Co je infekční anémie?

Infekční anémie koní (Anemia infectiosa equorum, INAN) – virové onemocnění charakterizované poškozením krvetvorných orgánů a projevující se opakujícími se nebo přetrvávajícími horečkami, anémií, hemoragickou diatézou při záchvatech horečky a dysfunkcí kardiovaskulárního systému.

Odkaz na historii. Poprvé byla nemoc popsána ve Francii Lignayem (1843). Anginiard v roce 1859 experimentálně prokázal nakažlivou povahu INAN injekčním podáváním krve pacientům s anémií zdravým koním. Carre a Balle (1904) prokázali virovou povahu onemocnění. V roce 1969 získal Copo kultivovaný virus v kultuře leukocytů.

Nemoc byla rozšířena během první a druhé světové války. V Rusku hlásil M. Potudin případy onemocnění u koní s INANem v roce 1910. V roce 1932 Ya E. Kolyakov, N. A. Romanov a A. A. Pinus stanovili první vědecky podloženou diagnózu INAN. V roce 1980 byl INAN registrován v některých evropských zemích, Japonsku, Kanadě, USA a v mnoha zemích Afriky, Jižní a Střední Ameriky.

Informace o patogenu – RNA virus patřící do rodu Lentivirinae, čeledi Retroviridae. Virus vykazuje vysoký stupeň polymorfismu. Nejčastěji jsou viriony kulového tvaru, s průměrným průměrem 90-140 nm, a mají dvouokruhový plášť. Ve virionu byly identifikovány dva sérologicky responzivní antigeny – solubilní a buněčně asociované, které jsou detekovány v RDP. Virus má hemaglutinační vlastnosti a obsahuje reverzní transkriptázu.

V krvi koní se s INAN tvoří neutralizační, precipitační, komplement fixující a antihemaglutinační imunobody.

Kromě organismu jednokopytníků se virus INAN množí v buněčných kulturách z koňské kostní dřeně a leukocytů za vzniku CPD. V jiných buněčných systémech dochází k akumulaci viru bez destrukce monovrstvy.

Stabilita V lyofilním stavu při 18 °C zůstává virus virulentní po dobu 7 měsíců. Krátkodobé zmrazení neovlivňuje jeho činnost. Při O – 1 „Virus přežívá z chladu až 2 roky. Na seně a pastvě přetrvává až 9 měsíců. V období zima-podzim přežívá virus v ovsu 8,5 měsíce. Když dojde k biotermické úpravě hnoje, zemře do 30 dnů. Virus přetrvává v moči a kaši až 2,5 měsíce, ve sterilní vodě až 160 dní a v glycerinu až 7 měsíců. Virus ztrácí své virulentní vlastnosti při 58 ° C po 1-2 hodinách, když se vaří – po 1-2 minutách, pod vlivem slunečního záření při 20 – 28 ° C po dobu 1-3 hodin; 2% roztoky hydroxidu sodného a formaldehydu ho zabijí za 20 minut, 3% roztok kreolinu – za 30 minut. Suspenze bělidla s 2 % aktivního chloru zabíjí virus v odpadní vodě po třech dnech. Virus je inaktivován éterem, ale je odolný vůči trypsinu. epidemiologická data. V přirozených podmínkách infekční anémie postihuje především koně, ale i osly a muly. U hříbat je onemocnění často smrtelné. Osli a mezci jsou vůči viru INAN odolnější než koně. Jejich onemocnění často probíhá akutně i chronicky. Subkutánní nebo intravenózní podání 20 – 50 ml, často i 0,01 ml krve nebo séra zvířete nemocného INANem způsobuje akutní nebo chronické onemocnění koní, zejména hříbat (po 9 – 93 dnech). Zdrojem infekčního agens je nemocné zvíře. Nebezpečné je zejména zvíře v akutní fázi onemocnění a nosič viru při exacerbaci onemocnění. Koně s latentní formou onemocnění mohou být nositeli viru po dobu 7-10 a dokonce i 18 let. Existují však případy, kdy virus nebyl detekován u koní, kteří se zotavili z INA. Virus se z těla nemocného koně uvolňuje sekrety a exkrementy obsahujícími bílkoviny (moč, trus, nosní hlen, spojivkový sekret, mléko). Krmivo, voda, hnůj, podestýlka a další předměty kontaminované sekrety nemocných zvířat mohou být faktory přenosu viru. Ale nutriční kontaminace je zjevně málo důležitá. Někteří autoři zjistili, že při společném chovu zdravých koní a koní s infekční anémií (ve stejné stáji) nedochází k přenosu patogenu. Jiní badatelé došli k opačnému závěru. Zdraví koně onemocní v důsledku toho, že i minimální množství viru (0,01 ml krve nebo séra) pronikne do těla kůží. Tato okolnost nám umožňuje považovat krev sající hmyz (koňky, komáři, spáleniny) za hlavní faktor přenosu infekčního agens. Proto je INAN častěji zaznamenáván v létě, v údolích řek a nivách, v zalesněných a bažinatých oblastech s podzolovými kyselými půdami. V takových oblastech je koncentrace hmyzu sajícího krev vysoká a živné rostliny jsou chudé na karoten a minerály. Za těchto podmínek jsou koně i v létě zpravidla na nedostatečné stravě, která snižuje odolnost jejich organismu.

Infekce zvířat je možná vrozené, zejména při páření. Koně mohou onemocnět infekční anémií celoročně, ale v zimě a na jaře jsou pozorovány jen ojedinělé případy onemocnění, což jsou nejčastěji exacerbace chronického průběhu nebo latentní forma onemocnění. Podle dlouhodobých pozorování se výskyt INA u koní vyskytuje především ve 3. a 4. čtvrtletí roku – 68,9, resp. 26 % (Ya. E. Kolyakov, 1940).

Sezónnost INAN je determinována masivním náletem bodavého hmyzu (v červenci – srpnu), zejména na pastvinách a dokonce i v podmínkách ustájení zvířat. Virus INAN je také možné šířit chirurgickými nástroji, injekčními jehlami a pipetami, pokud nejsou dodržována pravidla asepse a antiseptik při očkování, operacích, odběrech krve apod. U různých plemen byla zjištěna nestejná přirozená odolnost skupiny koní. Nižší výskyt chorob u koní místních plemen a jejich mesticů je vysvětlován jejich větší přirozenou odolností, která je dána především jejich silnou konstitucí a vhodnými podmínkami krmení, ustájení a využití. Západoevropská plemena tažných koní (Ardennes, Brabançon, Percheron, Clydesdale aj.) nejsou odolná vůči viru INAN a vyznačují se 100% onemocněním v nefunkčních chovech. Úmrtnost během primárního propuknutí onemocnění se pohybuje od 20 do 80 %.

Epizootické ohnisko INAN obvykle trvá 3 – 5 měsíců. Zpočátku se zjišťují nemocní koně, u kterých je onemocnění akutní nebo hyperakutní, později jsou pozorovány případy chronického průběhu a latentní formy onemocnění. Pokud zdraví koně nejsou přivedeni do znevýhodněné oblasti, pak po 1 – 2 letech nejsou pozorovány žádné případy závažného onemocnění, ale mnoho zvířat může zůstat nosiči viru. Patogeneze. Virus INAN se do těla koně dostává zpravidla parenterální cestou, nejčastěji v důsledku mechanického přenosu hmyzem sajícím krev. S krví se dostává do všech orgánů a tkání, kde se rozmnožuje a hromadí. Jeho koncentrace je zvláště vysoká v kostní dřeni a krvi, protože virus INAN má tropismus pro leukocyty in vivo a in vitro. V důsledku virémie se objevuje horečka a zvyšuje se proliferace buněk RES a jejich fagocytární aktivita. Následně je narušena funkce krvetvorných orgánů. Červené krvinky naložené virem jsou intenzivně ničeny a 5 dní po infekci se jejich počet v 1 ml krve sníží na 1,5 – 3 miliony, v důsledku toho se hematokrit a množství hemoglobinu sníží o 50%. Jedním z hlavních příznaků onemocnění je proto anémie. Již 24 hodin po infekci se výrazně zvyšuje rychlost sedimentace erytrocytů (ESR). Prvky RES absorbují produkty hemolýzy a hemosiderin se hromadí v buňkách jater, sleziny a dalších orgánů. V důsledku cytopatogenního účinku viru na krvinky a parenchymální orgány se v krvi nemocných koní objevuje velké množství cizorodého proteinu (tkáňového antigenu), který vyvolává alergický zánět tkání a zvýšenou tvorbu protilátek proti těmto antigenům. Intra- a extravaskulární hemolýza erytrocytů je imunitního charakteru a 99% viru INAN je v krvi přítomno ve formě imunitního komplexu – virus + protilátka.

Průběh a příznaky. Inkubační doba je od 5 do 93 dnů, nejčastěji 10 až 30 dnů. V závislosti na odolnosti organismu, virulenci viru a mnoha dalších faktorech se rozlišují hyperakutní, akutní, chronické a latentní formy onemocnění. Hyperakutní průběh INAN je charakterizován neustálou vysokou horečkou, depresí, srdeční slabostí, zrychleným dýcháním, hemoragickou enteritidou a paralýzou zadních končetin. Onemocnění trvá několik hodin až 1-2 dny a končí fatálně. Akutní průběh onemocnění je doprovázen náhlým zvýšením teploty na 40 – 42 °C. Horečka se zpravidla stává trvalou. Zvíře je v depresi. Spojivky, sliznice nosu a úst jsou zpočátku hyperemické, později, jak nemoc postupuje, blednou, otečou, mastí a často na nich bývají pozorována mnohočetná bodová krvácení. Zvláště charakteristické jsou krvácení ve třetím víčku a na sliznici v blízkosti uzdičky jazyka. Objevuje se krvácení z nosu, kolika, průjem (výkaly se někdy mísí s krví). Srdeční činnost slábne, zrychluje se puls, vzniká městnavý edém v oblasti břicha, hrudníku a končetin (obr. 37). Nemocná zvířata stojí se skloněnou hlavou. Při pohybu se objevuje silná dušnost a bušení srdce a je pozorována vratká chůze. I přes zachovanou chuť k jídlu dochází u pacientů k rychlému úbytku hmotnosti. Akutní průběh trvá až měsíc, nejčastěji však 3-15 dní, končí fatálně nebo přechází v subakutní průběh.

Subakutní průběh trvá 2 – 3 měsíce, je pokračováním akutního průběhu nebo probíhá samostatně. Horečka střídá stadia remise, kdy tělesná teplota klesá k normálu, mizí další projevy onemocnění a zlepšuje se celkový stav zvířat. Existuje až 10 záchvatů horečky trvajících 3-5 dní a remise trvající 3-15 dní. Čím častěji a déle jsou recidivy horečky, tím rychleji se rozvíjí slabost a vyčerpání organismu. Subakutní průběh se stává chronickým nebo končí smrtí.

Chronický průběh INAN často je pokračováním subakutního průběhu, ale může se objevit nezávisle. Krátkodobé (1-3 dny) zvýšení tělesné teploty (až 40-41 °C), únava, dušnost, bušení srdce, pocení, svalový třes. Během remisí, trvajících 2 až 3 týdny až několik měsíců, se celkový stav zlepšuje a výkonnost koně se obnovuje. Při nevyhovujícím krmení a nadměrném vykořisťování koní se onemocnění zhoršuje, celkový stav zvířat se prudce zhoršuje a dochází k jejich úhynu. Latentní forma onemocnění se vyskytuje u odolných koní. Zvířata, i když zůstávají klinicky zdravá, mají pouze krátké zvýšení tělesné teploty po dlouhou dobu. Taková zvířata jsou přenašeči virů a mohou sloužit jako zdroj patogenů pro zbytek populace koní.

Během epizootické epidemie INAN průběh onemocnění je akutní v 16,7 %, subakutní v 10 % a chronický v 73,3 % případů. Průměrná doba trvání onemocnění v akutních případech je 17,6 dne a v subakutních případech – 48,7 dne. Všichni koně trpící akutní a subakutní INA obvykle umírají

patologické změny. Při pitvě mrtvol koní uhynulých na akutní a subakutní anémii se zjistí obraz sepse, hemoragická diatéza, zduření lymfatických uzlin, prudký nárůst (někdy i vícenásobný) a krevní náplň sleziny. Je tmavě červené barvy, ochablé konzistence a povrch řezu je hrudkovitý. Průřez játry má laločnatý vzor. Srdeční sval je degenerovaný a ochablý. Spojivka a sliznice nosu, úst, jakož i podkoží jsou bledé, někdy s ikterickým zabarvením. V chronickém průběhu onemocnění je často zaznamenána vyhublost, anemické slizniční a serózní tkáně a slezina normální velikosti nebo mírně zvětšená a granulovaná. Výrazný laločnatý vzor (muškátový oříšek) se nachází v játrech. Řez ukazuje šedobílé elevace (obr. V). Patohistologické vyšetření ve všech orgánech, zejména v játrech a slezině, odhalí otok buněk RES, difuzní proliferaci histiocyticko-lymfoidního typu a často fokální akumulaci buněk; v buňkách RES se hojně ukládá hemosiderin; v kapilárách a kolem cév jater, ledvin, srdce – přítomnost histiocytů, makrofágů a lymfoidních buněk. Při akutním průběhu onemocnění je červená pulpa sleziny naplněna krví. Centra jaterních lalůčků jsou zničena, nachází se krvácení, stagnace žluči a erytrofagocytóza. U chronicky nemocných zvířat je někdy zaznamenána nekróza jaterních buněk, proliferace lymfoidních buněk a snížení množství hemosiderinu. Často je pozorována hyperplazie slezinných folikulů, glomerulonefritida a degenerace myokardu.

Diagnóza diagnostikována na základě epizootických, klinických, hematologických, sérologických a patologických údajů. Ve zvláště obtížných případech, kdy data získaná jinými diagnostickými metodami nejsou typická, je diagnóza INAN stanovena na základě výsledků biologického testu. Při studiu epizootologických údajů se bere v úvahu doba trvání onemocnění, povaha a příznaky onemocnění, možné cesty zavlečení patogenu, dynamika nemocnosti a úmrtnosti během propuknutí onemocnění. Příčina úhynu koní v posledních několika letech je objasněna. Při vyšetření nemocných koní je věnována pozornost typu horečky, klinickým projevům hemoragické diatézy, bledosti viditelných sliznic, vyhublosti se zachovanou chutí k jídlu, neklidu zadních končetin, otokům. Zvýšená dráždivost srdce u nemocných zvířat se zjišťuje funkčním testem. Pro sérologickou diagnostiku INAN byly vyvinuty RSC, RDP, RIF, RTGA, ale praktické uplatnění v SSSR našel pouze RDP, pomocí kterého jsou identifikováni koně s akutním, chronickým i latentním průběhem onemocnění. RDP detekuje nosiče viru i 4 – 5 let po onemocnění. Antigen pro RDP je extrakt z homogenizované sleziny hříbat infikovaných virem INAN nebo kultivační tekutina obsahující virus ošetřená etherem. RDP se nastavuje podle schématu, které umožňuje porovnat identitu precipitačního pásu, který se objeví mezi antigenem a testovaným sérem, s precipitačním pásem testovacího systému. Při hematologickém vyšetření nemocných koní se zjišťuje počet erytrocytů, leukocytů a hemoglobinu, ESR, vzorec leukocytů (tab. 20) a retrakce krevní sraženiny.

diferenciální diagnostika. Při diagnostice INAN je třeba vyloučit onemocnění s podobnými klinickými projevy: piroplazmózu, nuttaliózu, trypanosomiázu, leptospirózu, rhinopneumonii, helmintické zamoření atd. Piroplazmóza je charakterizována sezónností: duben – květen nebo srpen – září v závislosti na době parazitace přenašeči (klíšťata). Nemoc je akutní. Při vyšetření krve se v červených krvinkách nachází původce onemocnění Piroplasma caballi. U nuttaliózy je maximální počet nemocných koní izolován v červnu. Onemocnění se vyskytuje akutně, subakutně a vzácně chronicky, způsobeno endoglobulárním parazitem Nuttallia equi, vyznačující se horečkou do 40 – 41,5 °C, depresí, sníženou chutí k jídlu, zrychleným tepem a dýcháním, žloutenkou, sníženým počtem červených krvinek a hemoglobinu obsah, střevní atonie. Z trypanosomiázy, jako choroby přenášené vektory, byla na území SSSR u koní zaznamenána nemoc chovu a Su-aura. Původce onemocnění chovu se přenáší při pohlavním styku a onemocnění je charakterizováno parézou rtů a uší, depigmentací kůže stydkých pysků. Trypanozomy jsou pravidelně detekovány v periferní krvi. Su-aura se vyznačuje horečkou, otokem podkoží, chudokrevností a přenáší se při páření. Původci onemocnění (jednobuněční vřetenovití, pohybliví parazité) se množí především v krvi hostitele podélným dělením a jsou přenášeni koňskými mouchami, někdy i jiným krev sajícím hmyzem a přenášejí se i při páření. Leptospiróza je vyloučena na základě: studií krevního séra pacientů pro mikro- a makroaglutinační reakce; mikroskopické vyšetření moči a krve (při horečce); klinické projevy a patologické změny. Virová onemocnění koní, jako je chřipka a rhinopneumonie, se od INANu liší vysokou nakažlivostí, rychlým a plošným šířením, krátkým průběhem a převažujícím poškozením dýchacího systému. K diagnostice těchto onemocnění se používají specifické laboratorní metody (izolace viru v buněčných kulturách a kuřecích embryích, sérologické reakce). Při helmintickém napadení, zejména při paraskarióze, se anémie obvykle vyskytuje bez horečky a lze ji snadno vyloučit pomocí skatologického vyšetření.

Léčba nevyvinuté, nemocní koně jsou zničeni.

imunita. V krvi nemocných koní jsou detekovány protilátky fixující komplement, neutralizující viry a precipitující protilátky. Proto koně, kteří se zotavili z INAN, často získávají určitou odolnost vůči opětovné infekci. Vztah mezi humorálními protilátkami a intenzitou imunity koní vůči viru INAN však není dostatečně objasněn. Vakcína proti této nemoci byla vyrobena a patentována ve Francii.

Preventivní a kontrolní opatření. Hlavními opatřeními k prevenci INAN jsou přísná veterinární kontrola prodeje, stažení a pohybu koní, včasné informování o přítomnosti zvířat podezřelých z onemocnění, preventivní karanténa nově příchozích koní a sérologické testování RDP. Hlavním rezervoárem viru v přírodě jsou klinicky nemocní a zřejmě zdraví – latentně nemocní koně. Jejich okamžitá izolace a likvidace a ochrana koní před pokousáním hematofágním hmyzem jsou předpokladem úspěšné prevence kontroly onemocnění. U koní podezřelých z infekce je denně měřena tělesná teplota a dvakrát měsíčně se u nich provádí důkladné klinické vyšetření. Tyto koně lze využít pro práci na farmě v karanténě. Maso zabitých koní se vaří a krmí masožravci a ptáci (ale ne prasata). Po stanovení diagnózy INA je farma umístěna do karantény a dle instrukcí jsou prováděna zdravotní opatření. Koně s nejasnými příznaky onemocnění jsou izolováni a podrobeni pečlivému klinickému a sérologickému testování v RDP. Po izolaci nemocných koní a následně každých 2 dní až do zrušení karantény se prostory dezinfikují 15% roztokem louhu sodného. Hnůj se biotermicky neutralizuje po dobu 4 měsíců. K boji proti hematofágům se používají insekticidy: koně se postříkají 3% roztokem kreolinu (účinný po dobu 3 – 3 hodin). Při práci na koních používejte ochranné pásky napuštěné 5% roztokem kreolinu. Při provádění terapeutických a diagnostických manipulací (podávání léků, odběr krve, malleinizace, rektální termometrie atd.) je nutné používat sterilní a individuální nástroje. Karanténa z nepříznivého bodu je odstraněna po 10 měsících od data poslední porážky nebo úhynu nemocného koně za předpokladu, že na farmě nezůstala žádná nemocná zvířata nebo nosiči virů (v PRV se provádí sérologická studie). Prodej nebo přemístění koní do jiných chovů je povoleno pouze 3 měsíce po zrušení karantény a negativních výsledcích krevních sérových testů dle PRV.

Infekční anémie je akutní nebo chronické onemocnění kopytníků, charakterizované poškozením krvetvorných orgánů, opakovanými horečkami, septickými jevy, hemoragickou diatézou, anémií s poklesem obsahu hemoglobinu a počtu červených krvinek, poruchami kardiovaskulárního systému. ztráta síly a prodloužené přenášení viru.
INAN byl poprvé popsán ve Francii Ligaey (1843), Care and Bale (1904) prokázali virovou povahu onemocnění a prokázali, že patogen je obsažen v krvi a orgánech nemocného zvířete. V Rusku byla nemoc registrována v roce 1910 a v roce 1932. Ya. E. Kolyakov a spoluautoři jako první vyvinuli diagnostické metody.
V přírodních podmínkách jsou koně, osli a mezci ovlivněni INANem. Zdrojem infekčního agens jsou nemocná zvířata. Koně s latentním průběhem onemocnění mohou být nositeli viru po dobu 10 let i déle. Virus se z těla nemocných koní uvolňuje v sekretech a exkretech obsahujících bílkoviny: moč, výkaly, nosní hlen a mléko. Mezi faktory přenosu patří krmivo, voda, hnůj a stelivo. Hlavní cesta infekce je přenosná krev sajícím hmyzem, zejména koňskými muškami, v jejichž slinách virus dlouhodobě přetrvává. Zdraví koně mohou onemocnět INANem v důsledku toho, že se do těla dostane kůží i 0,01 ml infikované krve. Nemoc je častěji registrována v létě (výrazná sezónnost a stacionárnost).
V poslední době byla podle OIE nemoc zjištěna v USA, Austrálii, Japonsku, Indii, afrických zemích, Evropě a také v zemích SNS a Rusku.
Koňský průmysl v zemích, kde je zaznamenána infekční anémie, utrpí velké ekonomické škody. Úmrtnost v primárních ohniscích onemocnění se pohybuje od 20 % do 80 %. Zvláště velké náklady si vyžádají komplexní opatření pro diagnostiku, prevenci a eliminaci onemocnění.
Virus patří do čeledi Retroviridae (z latinského Retro-reverse), rodu Lentivirus (z latinského Ltnti – pomalý), tedy zahrnuje pomalé viry.
Virus obsahuje jednovláknovou RNA, ale jeho genom je na rozdíl od všech ostatních známých virů diploidní a skládá se ze dvou identických molekul RNA spojených vodíkovými můstky. Virion, stejně jako všechny retroviry, obsahuje RNA-dependentní DNA polymerázu (reverzní transkriptázu), která zajišťuje syntézu DNA na virionové RNA matrici. Replikace virionové nukleové kyseliny prochází fázemi tvorby dvouvláknové DNA proviru s jeho integrací s buněčným genomem.
Virus je citlivý na éter, tepelně stálý, var ho zničí za 1-2 minuty, sluneční záření ho inaktivuje za 1-3 hodiny. Virus přetrvává v moči a hnoji až 2,5 měsíce a v infikovaném senu až 9 měsíců.
Kmeny viru INAN izolované v různých částech světa jsou antigenně identické. Základní protein, který je jim společný, se nachází v RSC, RZSC a RDP. Membránové glykoproteiny jsou přitom vždy variabilní, což u RN odlišuje jeden kmen od druhého.
Imunita u INAN nebyla dostatečně prozkoumána. Po dlouhou dobu byla prodloužená povaha průběhu INAN a dlouhodobé přežití (perzistence) patogenu v těle zvířat vysvětlováno porušením nebo snížením imunitní odpovědi těla na virus. A teprve studie posledních dvou dekád objevily v krevním séru nemocných koní protilátky fixující komplement, precipitující a virus neutralizující protilátky. Protilátky jsou detekovány mezi 14-120 dny po infekci a někdy po celý život zvířete. Vztah mezi protilátkami a stupněm imunity koní vůči viru však není dobře znám. Protilátky neutralizující virus, které se tvoří, tedy nejsou schopny zabránit relapsům onemocnění ani virus neutralizovat. Bylo zjištěno, že 99 % infekčního viru INAN cirkulujícího v krvi je spojeno s protilátkami ve formě komplexu antigen-protilátka. Virus INAN během svého dlouhodobého přetrvávání v těle koně výrazně mění své biologické vlastnosti, což zpochybňuje možnost účinného očkování proti této nemoci.
Nebyla vyvinuta žádná léčba. Zvířata nemocná INANem jsou poražena.
Diagnóza INAN se provádí složitým způsobem. Zohledňují se epizootické znaky, výsledky klinických, patologických, hematologických, sérologických studií a biologických testů.
Nejinformativnější, nejlevnější a má krátkou dodací lhůtu je sérologický test koňského krevního séra v difúzní precipitační reakci (DPR) na INAN.
V roce 1978 náš biozávod začal ovládat technologii výroby sady diagnostických souprav INAN horse v RDP pod dohledem vývojářů: zaměstnanců VNIITIBP – Tokarik B.I., VGNKI – Sharabrin O.I., VIEV – Yurov K.P workshop č. 2 – začátek workshop Volostnykh S.I. Vypracovali jsme technologii pro získání antigenu a antiséra a kontrolu soupravy.
Diagnostikum INAN bylo testováno v rozsáhlých výrobních zkušenostech v regionálních veterinárních laboratořích ČR.
Zpočátku se vyráběla souprava ve formě antigenu a antiséra pro 90 nebo 120 studií.
Následně byla do diagnostické soupravy INAN přidána kromě antigenu 1 lahvička antiséra, 3 lahvičky antiséra a 1 lahvička 1,5 g agaru Difko, 1 lahvička 1,6 g kyseliny borité, 1 lahvička 5 % RDP hydroxid sodný – 10 cm3 pro 90-120 studií, což umožnilo standardizovat reakci ve všech laboratořích za použití stejných přísad.
Antigen je skupinově specifický pro všechny kmeny viru INAN. Princip reakce je založen na protidifúzi protilátek (imunitní sérum) a rozpustného antigenu v agarovém gelu. Pokud testované sérum obsahuje protilátky homologní s antigenem, vytvoří se precipitační pás.
Specifické protilátky se objevují v krvi zvířete 2-6 týdnů po infekci a přetrvávají po dlouhou dobu (více než 7 let).
Precipitační reakce v agarovém gelu se zaznamená po 48-72 hodinách.
Nastavení difúzní srážecí reakce v agarovém gelu je velmi podrobně popsáno v návodu k použití a nevznikají prakticky žádné otázky. Diagnostické soupravy INAN jsou na trhu již více než 38 let a osvědčily se jako pozitivní pro diagnostiku INAN u koní. Snadná instalace a vysoká citlivost pro detekci protilátek v krvi zvířete v případě infekce virem INAN umožňují široké použití diagnostických souprav INAN pro koně v Ruské federaci a zemích SNS.
V případě zjištění koní INAN je farma prohlášena za nebezpečnou, je v karanténě a jsou přijata opatření dle pokynů k likvidaci INAN.
Omezení na farmě se ruší po odebrání všech koní, kteří reagují pozitivně, obdržení dvojnásobného negativního výsledku v PRV s intervalem mezi testy 45 dnů a provedení závěrečných veterinárních a hygienických opatření. Po třech měsících je provedena jednorázová kontrolní studie celé populace v PRV.